《一种高温度稳定性的突变壳聚糖酶》

技术简介：

本发明涉及基因克隆,定点突变,基因重组技术,具体公开了从阿维链霉菌中克隆的新的46家族糖苷水解酶壳聚糖酶(SaCsn46A)的突变体,该酶由271个氨基酸组成,其中包含34个氨基酸信号肽。通过分析该酶蛋白结构上的高去折叠自由能位点,以此选择突变位点进行突变,筛选出温度稳定性提高的壳聚糖酶突变体。本发明将原始酶SaCsn46A第237位甘氨酸突变为丙氨酸(G237A),将突变体在大肠杆菌Rosetta中进行表达。通过与野生型壳聚糖酶比较,发现突变酶的温度稳定性相比于野生菌型的温度稳定性提高了4.8倍。薄层色谱分析结果表明,该酶水解产物主要为氨基葡萄糖GlcN和(GlcN)-2。

研发人员：郭静;高文君;潘文鑫;满在伟;蔡志强